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酶底物法程控定量封口機(jī)檢測(cè)大腸桿菌方法

來(lái)源:西安海研生物科技公司         發(fā)布時(shí)間:2019-04-18

采用酶底物法對(duì)地表水水樣進(jìn)行不同倍數(shù)的稀釋后進(jìn)行培養(yǎng)檢測(cè),觀察地表水結(jié)果變化。結(jié)果表明:地表水水樣稀釋倍數(shù)越小,結(jié)果越精確。采用酶底物法測(cè)定地表水中的糞大腸菌群具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn),精確掌握水樣稀釋倍數(shù)對(duì)測(cè)定結(jié)果就越精確。

程控定量封口機(jī)

加入含有總大腸菌群細(xì)菌的水樣,放入程控定量封口機(jī)中,目標(biāo)細(xì)菌在Minimal

MediumONPG-MUG培養(yǎng)基中36℃培養(yǎng),總大腸菌群細(xì)菌產(chǎn)生的特異性生物酶β

一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色;

同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG

培養(yǎng)基中的熒光底物MUG,產(chǎn)生特征性熒光。同樣原理,耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5

℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG

,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。

9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口機(jī)配合51孔定量盤或97

孔定量盤提供簡(jiǎn)單、快速、精確的定量檢測(cè)總

大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實(shí)驗(yàn)方案。51孔定量盤和97孔定量盤是基于傳統(tǒng)方法可能數(shù)(MPN)

統(tǒng)計(jì)模型而設(shè)計(jì)的半自動(dòng)定量方法。

程控定量封口機(jī)自動(dòng)將樣品/試劑混合液分配到獨(dú)立孔中。

培養(yǎng)結(jié)束后,陽(yáng)性孔數(shù)可以轉(zhuǎn)化為MPN值。

51孔定量盤可檢測(cè)每100mL水樣中1-200MPN值。

97孔定量盤可檢測(cè)每100mL水樣中1-2,419MPN值。

整個(gè)檢測(cè)過程手工操作時(shí)間小于1分鐘。

【使用方法】

定性測(cè)試:

第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解,36℃培養(yǎng)24h;

第二步、結(jié)果判讀

無(wú)色=陰性

黃色=總大腸菌群陽(yáng)性

黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色為陽(yáng)性

定量檢測(cè)

第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解;

第二步、倒入51孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)或97孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)中;

第三步、用程控定量封口機(jī)對(duì)定量檢測(cè)盤(定量孔板)進(jìn)行封裝,36℃培養(yǎng)24h;

第四步、51孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)結(jié)果判讀:

無(wú)色=陰性

黃色格子=總大腸菌群陽(yáng)性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)

注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色格子為陽(yáng)性結(jié)果,查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)。

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